尊龙凯时人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM)ELISA试剂盒仅限于科研用途,禁止用于医学诊断。
试剂盒原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入到已经预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育后彻底清洗。接着,通过底物TMB的显色反应,在过氧化物酶的催化下,TMB转变为蓝色,最终在酸性环境中呈现黄色。显色强度与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm处测定吸光度(OD值),从而计算出样品浓度。
试剂盒组成
本试剂盒包含以下成分:
- 微孔酶标板:96孔配置(12孔×8条)或48孔配置(12孔×4条)
- 标准品:03mL*6管
- 样本稀释液:6mL(96孔)或3mL(48孔)
- 检测抗体-HRP:10mL(96孔)或5mL(48孔)
- 20×洗涤缓冲液:25mL(96孔)或15mL(48孔)
- 底物A及B:各6mL(96孔)或3mL(48孔)
- 终止液:6mL(96孔)或3mL(48孔)
- 封板膜:2张
- 说明书:1份
- 自封袋:1个
特别说明:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。试剂盒应在2-8℃保存,有效期为6个月。
样品收集及处理方法
样品的收集、处理及保存通常包括以下步骤:
- 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免细胞刺激,收集后3000转离心10分钟以分离血清和红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素防止凝血,3000转离心30分钟获取上清。
- 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织用生理盐水搅拌均匀,3000转离心10分钟获取上清。
- 保存:如未能及时检测,请按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,并确保样品均匀解冻。
所需设备
使用此试剂盒时,需要准备以下设备:
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
操作步骤及注意事项
在操作过程中,请遵循以下注意事项:
- 试剂盒取出后应在室温下平衡15-30分钟再使用,未用完的板条应密封保存。
- 洗衣液若有结晶析出,稀释时可用温水帮助溶解。
- 每步加样需使用加样器,具体加样时间控制在5分钟内,样本数量多时推荐使用排枪加样。
- 每次测定需附标准曲线,并进行复孔测定。
- 封板膜限于一次性使用,以防交叉污染。
- 严格按照说明书操作,试验结果应以酶标仪读数为准。
- 底物需避光保存,所有样品、洗涤液及废弃物应按规定处理。
- 不同批次的试剂不得混用。
温馨提示:购买尊龙凯时公司的ELISA试剂盒可享受免费的ELISA代测服务,详情请咨询销售经理或在线客服。