在生物医疗领域,电泳缓冲液的配制是实验中的重要步骤。本文将介绍两种常用缓冲液的组成及其制备方法,以帮助科研工作者更好地应用于分子生物学实验。
1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
本缓冲液主要用于核酸电泳,配制1L溶液的成分及配比如下:
- 2mol/L Tris碱:242g
- 1mol/L 乙酸:571ml的冰乙酸(174mol/L)
- 100mmol/L EDTA(pH 8.0):200ml的0.5mol/L EDTA
- 纯净水:补足至1L
2. 5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液
此缓冲液同样适用于凝胶电泳,1L溶液的配制如下:
- 445mmol/L Tris碱:54g
- 445mmol/L 硼酸盐:275g
- 10mmol/L EDTA:20ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 纯净水:补足至1L
3. 染料制备
常用的电泳染料包括:
- 1%溴酚蓝:将1g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100ml水中,搅拌直至完全溶解。
- 1%二甲/苯青FF:将1g二甲/苯青FF溶解于适量水中,定容至100ml。
- 10mg/ml的溴化乙锭:小心称取1g溴化乙锭,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解,并于4℃保存。
4. 凝胶上样液
承载样品的凝胶上样液有多种类型,以下列举几种配制方法:
6×碱性凝胶上样液
所需成分及配比:
- 0.3N氢氧化钠:6mmol/L
- 18%聚蔗糖(400型):300µl
- 0.15%溴甲酚绿、0.25%二甲/苯青FF:各120µl
- 水:补足至10ml
6×聚蔗糖凝胶上样液
成分包括:
- 0.15%溴酚蓝、0.15%二甲/苯青FF:各100µl
- 5mmol/L EDTA:15g
- 15%聚蔗糖(400型):补足至10ml
在安全合规的前提下,使用尊龙凯时品牌提供的实验材料和缓冲液组件,可以确保实验的顺利进行并提高实验结果的准确性。
本文对电泳缓冲液的制备过程进行了详细描述,希望能够为生物医学领域的研究者提供实用的参考和帮助。