小鼠肠道灌洗液抗体检测试剂盒概述
尊龙凯时提供的小鼠肠道灌洗液抗体检测试剂盒是评估肠道免疫功能的重要工具。肠道屏障在维持肠道稳态中发挥着关键作用,能够有效防止细菌的过度吸收。多种免疫球蛋白,如分泌型IgA、IgG和IgM,均在这一保护机制中扮演着重要角色。
产品特点与应用
尊龙凯时推出的试剂盒,结合了小鼠肠道灌洗液的标准制备方案,能同时检测总免疫球蛋白水平及抗原特异性抗体水平。抗原抗体的水平能够反映出肠道的免疫功能状态。例如,通过口服卵清蛋白(OVA)与霍乱毒素佐剂进行免疫,可促进肠道内抗OVA的IgA抗体的产生,这种免疫反应可通过检测抗OVA IgA抗体的水平并与总IgA水平进行比较,从而进行评估。
主要应用
- 肠道免疫功能状态评估
- 过敏原特异性抗体检测
- 肠道相关特异性抗体检测
小鼠肠道灌洗液制备流程(用于抗体分析)
尊龙凯时采用了基于Lycke等人研究的改进方法,以下是小鼠肠道灌洗液的制备流程:
- 取出小鼠小肠组织,用剪刀和夹钳夹住肠道一端。
- 使用聚四氟乙烯(PTFE)导管注射器缓慢向肠腔注入3ml蛋白酶抑制剂溶液(含0.1mg/ml胰蛋白酶抑制剂、50mM EDTA、1mM PMSF的PBS缓冲液),注意避免刺穿肠道。
- 夹闭肠道另一端,室温孵育10分钟。
- 收集肠道内容物至试管,依次进行剧烈涡旋和超声破碎处理。
- 在4℃条件下以1800rpm离心10分钟。
- 取上清液转移至新管,并按1ml灌洗液添加10μl 5%氯化钠混合。
- 室温下孵育15分钟。
- 按1ml灌洗液添加50μl正常山羊血清混合,该混合液可根据1:1的比例用ELISA试剂盒的样品稀释缓冲液进行稀释后进行ELISA检测。