细胞冻存是生物医疗领域中一种关键的细胞保存手段，通过低温技术有效延缓细胞的生命活动。这项技术允许细胞在需要时得以复苏，为各种实验提供支持。19世纪末，科学家们开始关注低温对生物组织的影响，早期的研究发现，单纯冷冻会导致细胞内冰晶形成及渗透压失衡，进而导致细胞死亡。

1937年，Luyet和Hodapp提出了“冰晶损伤”理论，为后续的冷冻保护研究奠定了重要基础。1949年，英国科学家在精子冻存实验中意外发现甘油能够显著提高冷冻后精子的存活率。甘油作为一种渗透性冷冻保护剂（CPA），能够进入细胞内，降低冰点并减少冰晶的形成，平衡细胞内外的渗透压，从而防止细胞在冻存过程中由于脱水而裂解。

1959年，科学家们发现二甲基亚砜（DMSO）同样具备优异的冷冻保护效果，尤其适合哺乳动物细胞。由于DMSO更易穿透细胞膜且毒性较低，它迅速成为细胞冻存的标准保护剂之一。1963年，Peter Mazur提出了冷冻损伤的“两因素假说”，强调快速冷冻时细胞内冰晶形成会破坏细胞膜，而慢速冷冻则导致细胞外冰晶形成，造成细胞脱水和化学毒性。这一理论为程序化慢冻法提供了科学依据。

在实验过程中，大多数细胞的冻存遵循“慢速冻存”的原则，通过程序降温盒或程序化冷冻仪，控制降温速率（通常为1°C/min），使细胞在冷冻过程中逐渐脱水，从而避免细胞内结冰，这一方法显著提升了冻存细胞的存活率。研究表明，5%-10%的DMSO最适合细胞冻存，具体比例应根据细胞类型进行调整；对于对DMSO敏感的细胞，需要降低其浓度。根据小尚的经验，8%DMSO适用于大多数细胞系。同时，还需根据细胞培养的难度调整血清比例，较难养殖的细胞需增加血清用量，而过于脆弱的细胞可选择血清+DMSO冻存，而不添加培养基。我们推荐的冻存液配方是92%胎牛血清（FBS）+8%DMSO（新手推荐）或92%完全培养基+8%DMSO（专业推荐）。

关于冻存液的相关产品，尊龙凯时提供的高品质胎牛血清呈浅黄色澄清，无溶血，经过严格检测，确保无菌、无支原体、无噬菌体及相关牛源病毒，低内毒素（<3EU/mL），不含外源激素、生长因子、抗生素等，适合多种细胞类型的培养，并保证细胞生长速度和形态正常。

尊龙凯时的非程序性细胞冻存液（货号：SNR-006）是一种不含血清且不需要经过程序降温步骤的冻存液，可以重悬细胞后直接放入超低温冰箱，极大地简化了细胞冻存操作，并降低血清对细胞及实验的影响。不论使用何种冻存液，建议在正式冻存前进行冻检：即冻存24小时后复苏一支，以确认细胞状态正常，再进行大批量冻存。成功的冻检前，建议至少留存一瓶细胞培养，以防复苏失败导致细胞绝种。

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