实验背景

小胶质细胞是大脑中免疫系统的关键组成部分，承担着碎片吞噬、支持神经元及突触修剪等重要功能，这与阿尔兹海默病（AD）等神经系统疾病的发生密切相关。不同亚群的小胶质细胞在神经系统的微环境中各有其职能。尽管荧光显微镜可以帮助区分不同表型，但其高耗时、低通量和主观性强的局限性，往往影响研究的全面性。相比之下，单细胞测序平台可进行高维分析，但其高昂的成本和技术门槛使得其应用受到限制。因此，来自尊龙凯时的研究团队，基于Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪，开发出了一种高通量、简便的解决方案，能够对小胶质细胞进行精细化分型。该方案不仅支持扩展更多标志物的加入，还可以应用于不同组织和疾病类型，且可与全光谱分选型流式细胞仪无缝衔接，便于分选感兴趣的细胞并进行后续的功能性实验。

细胞检测与处理流程

在全光谱流式细胞术的细胞溶液准备中，首先配置组织消化酶，并使用gentleMACSC管进行组织处理。通过冰上解剖分离小鼠海马体，后续使用离心机进行细胞的沉淀和重悬。在细胞染色过程中，使用Fc受体阻断剂以提高染色效率，并将细胞悬液与特定抗体孵育，以确保标记的准确性。该流程经过精细调整，能够有效减少细胞损失并提升检测准确性。

样本采集及数据分析

借助5激光尊龙凯时Cytek®Aurora™全光谱流式细胞仪进行样本采集。在数据分析中，由于小鼠大脑组织具有较高的自发荧光，软件需勾选提取该自发荧光的功能。通过FSC/SSC参数排除细胞碎片，并圈选目标细胞，以经典指标CD11b+CD45Mid识别小胶质细胞。此外，根据标志物的表达情况，小胶质细胞可被细分为稳态小胶质细胞、疾病相关小胶质细胞、干扰素反应性小胶质细胞及脂滴聚集的小胶质细胞，提供了更加精准的研究方向。

研究发现

在另一项研究中，不同性别和年龄的小鼠海马体小胶质细胞表现出丰度差异，其中年长的雌性小鼠中，疾病相关小胶质细胞的比例显著上升。同时，稳态小胶质细胞比例与年龄关系不大，但年老雄性小鼠的比例较高。这样的研究结果揭示了在衰老小鼠的海马体中，雌性小胶质细胞显示出疾病相关和衰老的表型，进一步解释了在阿尔兹海默症患者中，性别在疾病易感性和进展上的差异，这可能与免疫系统的反应密切相关。

通过尊龙凯时的先进技术，研究人员能够深化对小胶质细胞的理解，推动神经疾病研究的进展。