尊龙凯时提供的人急性淋巴母细胞白血病细胞MKN45培养指南，涵盖了细胞的培养条件、处理方法及注意事项，旨在为科研与临床实验提供可靠参考。

一、细胞培养条件

细胞名称：人急性淋巴母细胞白血病细胞MKN45
生长特性：悬浮生长
冻存条件：使用无血清冻存液（货号：C7001）
培养体系：1640培养基（含NaHCO3 15g/L）+10%胎牛血清+1%青霉素-链霉素
传代方法：首轮传代建议比例为1:2，2天后更换培养基。

二、细胞收到后的处理

收到细胞后，建议尽快培养至良好状态，并用完全培养液灌满瓶子并封好瓶口，以确保细胞状态稳定。处理方式如下：
1. 用75%酒精对细胞瓶外部进行消毒，然后在超净台内进行严格的无菌操作。
2. 将细胞瓶置于37℃、5%CO2培养箱中静置3-4小时，以便稳定细胞状态。
3. 使用显微镜观察细胞生长情况，并拍摄不同倍数的照片进行保存，前三天的照片为重要的售后依据。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

若细胞汇合度未超过80%，可收集培养液，保留5ml完全培养基，置于37℃、5%CO2的培养箱待培养。若超出80%，请按以下步骤传代：
1. 弃去上清液，使用不含钙、镁的PBS清洗细胞。
2. 加入0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶，置于37℃内消化1-2分钟，观察细胞变化后快速停止消化。
3. 将细胞轻轻吹打后吸出，转移至15ml离心管中，在1000RPM下离心5分钟，弃去上清，将细胞重悬在1-2ml完全培养基中。
4. 按1:2比例进行分瓶传代，并补充新培养基至5-8ml/瓶。

b. 细胞冻存

1. 当细胞生长至80%覆盖率时，弃去培养液并用PBS清洗。
2. 加入0.25%胰蛋白酶消化液，待细胞变圆后加入完全培养液终止消化。
3. 转移至离心管内，在1000RPM下离心5分钟并弃去上清。
4. 加入1ml无血清冻存液（货号：C7001）混匀后转入冻存管中，之后直接放入-80℃冷冻。

c. 细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管并快速解冻，擦拭管外壁消毒。
2. 将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管中，在1000RPM下离心5分钟。
3. 停止后重悬于5ml完全培养基中，接种至T25培养瓶，放入培养箱中进行培养。

四、注意事项

在运输过程中，细胞可能脱落，属于正常现象。如脱落严重，请按照步骤进行重新处理。具体处理步骤与之前一致，确保细胞状态良好并按照比例传代。

五、售后条款

尊龙凯时承诺对出现问题的细胞进行重发，具体情况包括运输中细胞丢失、污染问题在收到后48小时内反馈等。如为客户操作不当或环境不当导致的不良情况，则不予以重发。请妥善保存所需的实验数据和照片，以便后续处理。